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岛津液相色谱仪检测清热止咳糖浆黄芩苷含量

2011-03-15

1 实验所需要的仪器: LC10A液相色谱仪日本 岛津紫外检测器(SPDIOA)DT100分析天平。清热止咳糖浆共 5批号。黄芩苷对照 中国药 品生物制品检定所。试剂均为分析纯。

2 测定条件 色谱 Hypersll ODS (250mm×4 Omm5,um);流动相:乙腈一甲醇一O 2  P04(103555);检测波长 28Onto;流速1 Oralrain;柱温 :室温 ;进样量 20tA

3 样品制备

31 供试品液的制备  精密量取 清热止 咳糖浆 样品 lml。置 lOOml量瓶中,加水至刻度,摇匀 。用 0451~m微孔滤膜滤过 ,进样。

32 对照品溶液的制备  取对照 品黄芩 苷适量 。加流 动相配制成 01mgml对照品溶液 ,进样。

33 空白样品的制备 量取缺 黄芩 药昧 的空 白样品 1m1.置 lOOml量瓶中,加水至刻度,摇匀  045~m微孔滤膜过滤 ,进样。

4 测定方法与结果

41  色谱 黄芩苷的峰保 留时间约为 59rain;黄芩苷与其相邻峰的分离度大于2;以黄芩苷峰计算理沦板数约7000,清热止咳糖浆中其它成分对黄芩苷的含量测定没有影响 ;空白样 品无干扰

42 线性 关系  精密称取黄芩苷对照品 2760rag置于 5Oral量瓶中,用流动相溶解定容作 为储备 液,精 密吸取 12468rnl各置于 lOml的量瓶中用流动相稀释定容。进样20t~l。以峰面积积分值为纵坐标,浓度为横坐标 ,绘制标准曲线 ,得 回归方程为 Y=405375X10787r=099995(rl 5),表明黄芩 苷浓度在 55444l_8  ml 围内线性关系良好

43 精密度试验 取浓度为2008 gml的黄芩苷对照液 2 l连续进样 5次。结果:黄芩苷峰面积积分值的 tlSD055(n 5)

44 回收率试验  分别 量取 已知含量 的样品 05ml,置于 100ml量瓶中,精密加入黄芩苷对照品484960627273rag。用蒸馏水溶解井稀释至刻度、摇匀。用O45m的微孔滤膜过滤,进样,结果加样回收率 10335(RSD=084%,n=6)

45 重现性试验 取同一批号样品(040208)5份,分别按样品测定法测定。测定5次,测得平均含量为 l355mr./mlRSD=043%。

5讨论 黄芩是清热止咳糖浆中的主药,黄芩苷是黄芩中的主要成份,因此测定黄芩苷含量可作为质控的一个重要指标。本实验采用 HPLC测定清热止咳糖浆中黄芩苷的含量。色谱分析十分理想,结果准确。由于样品是水溶液,所以直接用水稀释进样即可。流动相加人乙腈能使色谱峰峰形巫加尖锐,分离度也更好,而且流动相的酸度降低,减少了对柱的损坏。

 

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