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waters液相色谱仪检测人血浆中加替沙星浓度

2011-03-14

1  仪器

LC 10A液相色谱仪,包括二元泵、二极管阵列检测器、自动进样器 、柱温箱、V6.1色谱工作站;5415R冷冻变速离心机;LDZ5—2低速自动平衡离心机;XW 80A涡旋混合器

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱 :Hypersil C18(150ram×4.6mm,5 m);流动相:乙腈 一30ramol/L醋酸铵 ~三乙胺 磷酸 (20:80:1.0:0.7);流速:1.0ml/min;检测波长:294nm 柱温 :350~C。

2.2  溶液配制

准确称取加替沙星对照品 10.0rag,以甲醇为溶剂配成浓度为200 g/mI的贮备液,再用甲醇分别稀释成浓度为 1、10、50、lO0~tg/ml的工作液 ,溶液均置于冰箱中保存

2.3 样品处理

取 0.5ml空白血浆,加入加替沙星工作液适量,旋涡振荡30s,加入 7%高氯酸 0.2ml,旋涡振荡 lmin,离心 (12 O00r/min)5min,上清液经 0.45 m滤膜过滤 ,进样 30 l。

2.4 药动学研究

健康男性受试者 18名,年龄 (23±2.2)a,体重 (62±6.1) 身高(172~8.1)cm。试验前进行全身体格检查,肝肾功能、血尿常规、心电图均正常。试验前 2wk及试验期间未服用任何其它药物,试验前均签署知情同意书。禁食 12h,晨服 400mg加替沙星片,受试者在给药前及给药后 0.25、0.50、0.75、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6,0、8.0、12.0、24.0h取肘静脉血 4ml,3 500r/min离心 5min,取血浆 ,置于--200℃冷冻,待测。按上述方法测定受试者血浆中加替沙星浓度 ,加替沙星平均药一时曲线详见图2。t  、C… 取实测值;t  =0.693/Ke (Ke为末端消除速率常数,由对数血药浓度 一时问曲线末端直

线 部分斜率求得 );以梯形法计 算 AuC o~ AuC n--。。一AUC  +Ct/Ke。

 

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