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waters液相色谱仪测定大豆胚轴中单糖链大豆皂甙的含量

2011-03-10

1仪器和试剂

检测单元为Waters液相色谱仪是非常灵活的HPLC系统,包WatersTM 717 plus自动进样器;Waters 600E 制单元;WatersTM 805数据 处理机和 Waters 2410差示折光仪。液相色谱用试剂为色谱纯。

2色谱条件

色谱 柱为 ODS-AM303 (YMC46 mm×250 mm5m),柱温 40℃,流动相为含 01  三氟乙酸的乙腈 一水 (4060vv),流速 1 mL rain~,高纯氦气脱气 ,进样量 10 L,分析时间为 45 rain

3标样配制

大豆皂甙标 准品,实验室 自行制备,通过 IRFAS-MS HNMR和”C_NMR鉴定 ,液相色谱分析为单一峰。称取 BaBbBdBeagDg标准品 ,加 甲醇溶解定容至 10 mL,分别配成浓度为0561 05880396 05030344 0406 mg

mL叫的溶液,作为对照品溶液。分别吸取标准品液10 L,供 HPLC分析。

4试样制备

大豆冷冻干燥后 剥离胚轴 。将 3 kg大豆胚轴研磨粉碎 ,用 15 L 50  甲醇常温提取 ,提取液经喷雾干燥得粗粉 562 g。将粗粉用等体积正丁醇一水溶液萃取,取正丁醇层,经减压蒸馏、冷冻干燥,得总糖甙 223 g

5测定

称取总糖 01 g,用 甲醇定容 50 mL,以Milipore FH  05m过滤膜过滤后作为样品供试液。分别吸取供试液 1O L,供 HPLC分析。

6结论

建立了大豆胚轴 中单糖链大豆皂甙的液相色谱测定方法。采用差示折光检测法,结果峰面积值和进样量之间呈 良好 的线性关系 ,用于单糖链大豆皂甙的分析中优于紫外检测法。所建立的检测方法灵敏度 、重现性均能满足一般分析要求 ,可用于大豆皂甙样品中其它大豆皂甙的分析中。

 

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