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2020-01-14
液相色谱仪是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
液相色谱仪的主要操作步骤:
1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。
2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3、打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。
4、进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。
5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10ml/min。
6、调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。
7、设计走样方法。点击file,选取selectusersandmethods,可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击newmethod。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。
一个完整的走样方法需要包括:
a、进样前的稳流,一般2-5分钟;
b、基线归零;
c、进样阀的loading-inject转换;
d、走样时间,随不同的样品而不同。
8、进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。
9、关机时,先关计算机,再关液相色谱。
10、填写登记本,由负责人签字。
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