液相色谱仪提高温度往往有利于分离效果吗？

   错误! 随着温度升高，流动相粘度下降，因此分析物传质速率提高，所以就能够提供更好的色谱分离效果。正确，但是除了柱效，温度同样影响保留因子（k）和选择性（α）。温度的变化因素能够提高或降低分辨率（其实这也是色谱分析更关心的问题）。保留时间往往随着温度升高而降低，因为温度作为一个热力学参数，使得高温度下分析物倾向于留在流动相中，会更快的从柱子上洗脱下来。然后，不同的化合物可能对温度变化有不同响应程度的保留时间改变。更加确切的说，它们的范德霍夫线的斜率不同（ln k与1/T，T以温度计量）；换句话说，α值会变化。另外温度增加会使低k值的色谱峰出峰更快,甚至接近在无保留物质t₀附近出来,导致很难进行定量分析。

以analgesics（一种镇痛药，译者注）为例，图二显示的一系列的色谱图列出了七种镇痛药在柱温20-90°C的分离情况。我们从中可以发现许多特点。首先，所有分析物随着温度升高，保留时间变短且峰变窄，意味温度升高利于分离效果。其次，镇痛药之一的水杨酸（即阿司匹林）在峰5，6之间，随着温度变化位置改变较大。事实是在20-40°C时，该物质随温度变化，洗脱顺序也发生了变化。在中间的30℃时，水杨酸和第6号峰的非那西丁一起出峰。所以，温度大于40°C会引起分离时间变短和洗脱顺序发生变化。

当然，一个提高温度的好处在于降低了操作时的柱压，以便于使用更大的流速和粒径更小的填料。另一个在高温下能够导致色谱柱性能问题的因素是流动相的温差。如果柱子在60°C下操作，但是流动相在室温流入，那么进入的较冷的流动相就能够引起峰变形，原因是不同温度下分析物会趋向在高温的流动相中。所以建议大家在较高温度下使用色谱柱的时一定记得预热流动相。