液相色谱仪具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。

　1、开机

　　1.1打开电脑。

　　1.2打开液相色谱仪各个模块的电源。

　　1.3双击桌面“仪器-联机”，进入联机界面。

　　1.4排气：

　　1.4.1手动旋开泵处冲洗阀。

　　1.4.2右键单击“泵”图标区域，选择“方法”选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min，点击“确定”。

　　1.4.3右键单击“泵”图标，点击“控制”选项，选中“ON”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内无气泡为止，，切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。

　　1.4.4右键单击“泵”图标，点击“方法”选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀。

　　1.4.5右键单击“泵”图标，点击“方法”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min。

　　1.4.6同理右键单击“柱温箱”，“检测器”图标，点击“方法”选项，按照方法的要求设置温度，波长，点击“控制”选项，“ON”打开液相色谱仪柱温箱和检测器。

　　液相色谱仪使用步骤.jpg

　　2、编辑方法

　　2.1点击“方法”-“编辑完整方法”开始编辑完整方法。

　　2.2选中除“数据分析”外的三项，进入下一选项卡。

　　2.3方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息。进入下一选项卡。

　　2.4液相色谱仪泵参数设定：在“流速”处输入流量，如1.0ml/min，停止时间：如10min，按照要求选择合适比例的流动相配比，如乙腈：水=75：25，A为水，B为乙腈，则设置B：75%即可。进入下一选项卡。

　　2.5液相色谱仪自动进样器参数设定：选择“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，进入下一选项卡。

　　2.6液相色谱仪柱温箱参数设定：在“温度”下面的空白方框内输入所需温度，如：40度。进入下一选项卡。

　　2.7液相色谱仪UV检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如254nm。点击确定。

　　2.8在“运行时选项表”中，选中“数据采集”，点击“确定”。

　　2.9从“方法”菜单，选中“方法另存为”，输入一方法名，如“测试”，点击“确定”。

　　3、单次采集

　　3.1从“运行控制”菜单中，选择“样品信息”选项，选择合适的路径，在“数据文件”中选择“前缀/计数器”，输入样品瓶的位置，点击“确定”。

　　3.2基线平稳后约10分钟，从“运行控制”菜单中选择“运行方法”。

　　4、多次数据采集

　　4.1按照步骤2编辑完整方法。

　　4.2点击“序列”-“序列表”，输入“样品瓶”“样品名称”，“进样次数”，选择合适的“做样方法”。

　　4.3点击“序列”-“序列参数”，选择序列数据的保存路径，数据建议以选择“前缀/计数器”保存。

　　4.4从“序列”菜单，选中“序列另存为”，输入-序列名，如“测试”，点击“确定。

　　4.5从“运行控制”菜单中选择“运行序列”。

　　5、数据分析

　　5.1双击“仪器-脱机”图标进入的脱机画面。

　　5.2从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面。

　　5.3从“文件”菜单选择“调用信号”，选中数据文件名。点击“确定”，则数据被调出。

　　5.4做谱图优化：从“图形”菜单中选择“信号选项”。从“范围”中选择“满量程”或“自动量程”及合适的时间范围或选择“自定义量程”调整。反复进行，直到图的比例合适为止。点击“确定”。

　6、积分

　　6.1从液相色谱仪“积分”菜单中选择“积分事件”选项，选择合适的“斜率灵敏度”，“峰宽”，“小峰面积”，“小峰高”。点击，自动加载积分参数。

　　6.2点击左边“√”图标，将积分参数存入方法并退出“积分事件”。

　　6.3如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。

　　7、标准曲线

　　7.1点击“校正”-“校正设置”，输入“含量单位”。

　　7.2点击“校正”-“新建校正表”，点击确定。输入“化合物名称”和“含量”，点击“确定”，按照提示删除其他组分。

　　7.3至此完成单级校正，如要增加校正级别，应从“文件”菜单选择“调用信号”，选中数据文件名，点击“校正”-“添加级别”，点击确定，输入“含量”，依次增加校正级别。

　　液相色谱仪.jpg

　　8、打印报告

　　8.1从液相色谱仪“报告”菜单中选择“设定报告”选项，点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角，选中“外标法”，其它选项不变，点击“确定”。

　　8.2从“报告”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告”底部的“打印”钮。

　　8.3点击“文件”-“另存为”-“方法”，把数据分析方法保存，下次分析可直接在“文件”-“调用”-“方法”下，将该方法调出使用。

　　9、液相色谱仪关机

　　9.1液相色谱仪关机前，先关紫外灯，用相应的溶剂充分冲洗系统大约30分钟。

　　9.2退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。

　　9.3关闭液相色谱仪各模块电源开关。

　　10、液相色谱仪其它注意事项

　　10.1当样品运行时，切勿打开自动进样器前遮盖，否则进样过程停止。

　　10.2系统发生漏液时，液相色谱仪会检测到并停止进样，状态指示灯为红色。检查擦干并安置好漏液处，擦干漏液传感器，单击ON按钮，系统重新初始化。

　　10.3注意紫外灯使用寿命，切勿来回开关紫外灯。

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