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液相色谱仪的工作原理和保养知识

2019-05-21

对于刚刚应用液相色谱仪的人来说,一时很难弄清楚液相色谱仪的工作原理和保养知识因此我们瑞析小编准备介绍一下液相色谱仪的工作原理和保养知识大家感兴趣的话可以了解一下。

液相色谱仪的工作原理

储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。

液相色谱仪的保养

HPLC的日常操作条件:温度:10~30℃;相对湿度小于80%;好是恒温、恒湿,远离高电磁干扰、高振动设备,有良好的通风设施。

HPLC的环境设置:

HPLC用水可以通过以下几个方面来得到:

1专门的纯水机或超纯水机;

2去离子水重蒸;

3二次或三次重蒸水;

4采用类似家用的纯水机;

5市场上瓶装的纯净水或蒸馏水;

6其它途径;

不管采用何种途径,配制流动相应用新鲜水,水质越高放置时间越短。理想的HPLC用水应为18.2Ω的超纯水,并通过0.22um的滤膜,除去热源、有机物、无机离子及空气等。

HPLC六通阀进样器的使用及保养

六通阀进样器是液相色谱系统中理想的进样器,它是由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。美国Rheodyne公司的六通阀进样器为通用,各大HPLC仪器制造商均以此产品作为仪器的进样器。

工作原理:手柄位进样(Load)位置时,样品经微量进样针从进样孔注射进定量环,定量环充满后,多余样品从放空孔排出;将手柄转动至进样(Inject)位置时,阀与液相流路接通,由泵输送的流动相冲洗定量环,推动样品进入液相分析柱进行分析。

虽然六通阀进样器具有结构简单、使用方便、寿命长、日常无需维修等特点,但正确的使用和维护将能增加使用寿命,保护周边设备,同时增加分析准确度。如使用得当的话,六通阀进样器一般可连续进样3万次而无需维修。手柄处于Load和Inject之间时,由于暂时堵住了流路,流路中压力骤增,再转到进样位,过高的压力在柱头上引起损坏,所以应尽快转动阀,不能停留在中途。在HPLC系统中使用的注射器针头有别于气相色谱,是平头注射器。一方面,针头外侧紧贴进样器密封管内侧,密封性能好,不漏液,不引入空气;另一方面,也防止了针头刺坏密封组件及定子。

六通阀进样器的进样方式有部分装液法和*装液法两种。使用部分装液法进样时,进样量多为定量环体积的75%,如20μl的定量环多进样15μl的样品,并且要求每次进样体积准确、相同;使用*装液法进样时,进样量少为定量环体积的3至5倍,即20μl的定量环少进样60至100μl的样品,这样才能*置换样品定量环内残留的溶液,达到所要求的精密度及重现性。推荐采用100ul的平头进样针配合20ul满环进样。

以上就是液相色谱仪的工作原理和保养知识的相关介绍,希望能够帮助到有这方面需求的朋友们!如需了解更多的相关资讯,请继续关注我们网站。后续将呈现更多精彩内容哦!

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